Tersinir sonlandırıcı kimyası ile sıralama

Bu el altında, nükleotid birleştirme, floresans görüntüleme ve bölünmeyi içeren döngüsel bir işlemde tersinir sonlandırıcı bağlı dNTP'ler kullanır. Her dNTP eklenirken floresan etiketli bir sonlandırıcı görüntülenir ve ardından bir sonraki bazın eklenmesine izin vermek için bölünür. Bu nükleotidler her birleşme benzersiz bir olay olacak şekilde kimyasal olarak bloke edilir. Her bir baz birleştirme adımını bir görüntüleme adımı izler, ardından bloke edilen grup kimyasal olarak çıkarılır ve her bir ipliği DNA ile bir sonraki ekleme için hazırlanır. DNA Polimeraz. Bu birbirini izleyen adım sırası, kullanıcı tanımlı cihaz ayarları tarafından belirlendiği üzere belirli sayıda döngü için devam eder. 3 'bloke grupları başlangıçta enzimatik veya kimyasal tersine çevirme olarak tasarlandı Kimyasal işlem Solexa ve Illumina makinelerinin temeli olmuştur.Tersinir sonlandırıcı kimyası ile sıralama, Illumina / Solexa tarafından gösterildiği gibi dört renkli bir döngü olabilir veya Helicos BioSciences tarafından gösterildiği gibi tek renkli bir döngü. Helicos BioSciences, bir inhibitör olarak işlev gören ikinci bir nükleosid analoğuyla bloke edilmemiş sonlandırıcılar olan "sanal Sonlandırıcılar" kullanmıştır. Bu sonlandırıcılar, tek bir baz ilavesinden sonra DNA sentezinin sona erdirilmesi için grupları sonlandırmak veya inhibe etmek için uygun modifikasyonlara sahiptir .

Resim 155A | PacBio SMRT teknolojisi ve Oxford Nanopore, metilasyonla karşılaşmak için değiştirilmemiş DNA kullanabilir. | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) Wikimedia Commons'tan

Resim 155A | PacBio SMRT teknolojisi ve Oxford Nanopore, metilasyonla karşılaşmak için değiştirilmemiş DNA kullanabilir. | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) Wikimedia Commons'tan

Yazar : Yavor Mendel

Referanslar:

Moleküler Biyoloji Teknikleri I

Moleküler Biyoloji Araçları III

Yorumlar